制備色譜是指采用色譜技術制備純物質，即分離、收集一種或多種色譜純物質。那么高壓制備色譜是怎樣的一個過程，其目的是什么，這些都是本文將要探討的內容。

　　分析色譜是制備色譜的基礎。當我們在分析色譜上取得了良好的分離效果時，可以將其放大，應用到制備色譜上，由此，我們需要考慮調整上樣量，流速，梯度：

　　1.上樣量的調整：它與分析色譜柱和制備色譜柱的柱長和柱內徑有關：具體關系時;制備柱上樣量/分析柱上樣量=制備豬場/分析柱長*制備柱內徑的平方/分析柱內徑的平方;

　　2.流速的調整：制備柱流速/分析柱流速=制備柱體積/分析柱體積=制備柱長/分析柱長*制備柱內徑的平方/分析柱內徑的平方;

　　3.梯度的調整：制備柱梯度/分析柱梯度=制備柱體積/分析柱體積*制備柱流速/分析。

　　高壓制備色譜中的“制備”這一概念指獲得足夠量的單一化合物，以滿足研究和其它用途。高壓制備色譜的出現，使色譜技術與經濟利益建立了。制備量大小和成本高低是制備色譜的兩個重要指標。其中，氣相制備色譜主要用于石油化工產品和揮發性天然產物的色譜純樣品制備。

　　一、高壓制備色譜到底是什么?

　　分析色譜的目的，是分析出混合物中一個(或者幾個)純物質的含量。制備色譜的目的，是從混合物中得到純物質。為了加快分離的時間與提高分離的效率，制備色譜的的進樣品量很大，導致制備色譜柱子的分離負荷的相應加大，也就必須加大色譜柱填料，增大制備色譜的直徑和長度，使用的相對多的流動相。然而，當色譜柱上樣品負載加大的時候，往往導致柱效急劇下降而得不到純的產品。制備色譜，要解決容量與柱子效果之間的矛盾，對重現性也要考慮。從經濟上來說。制備色譜要爭取少用填料，少用溶劑，要盡可能多的得到產品。

　　二、固定相的選擇

　　硅膠、鍵合固定相(如C18)、離子交換樹脂、聚酰胺、氧化鋁、凝膠等都可以作為色譜柱的填料。 有不少文獻報道，對填料可以進行一下處理提高了分離效果，如，對硅膠進行的硝酸銀(或緩沖液)處理。

　　三、樣品的前處理

　　高壓制備色譜柱子由于處理的樣品多，比分析柱子更容易受污染，所以，必要的前處理就顯得非常的必要。萃取、過濾、結晶、固相萃取等簡單的分離方法，如果用得上，而且還不是很麻煩，就要盡可能多的采用以去掉雜質。

　　四、裝柱方法的選擇

　　根據固定相顆粒度和柱子的尺寸，采用不同的裝柱方法，往往裝填越好分離效果越好。裝柱效果跟填料的顆粒度關系很大，顆粒度的減少會導致裝柱的難度。

　　1.濕法裝填：一般來說，顆粒直徑小于20-30um的固定相采用濕法裝填。

　　2.敲擊-裝填：所謂“敲擊-裝填”技術適用于顆粒直徑大于25um的固定相。

　　3.濕法：濕法的目的是迫使相對稀松的固定相懸漿以高速裝入色譜柱子，從而減少空隙的形成。

　　然而，當柱直徑大于20mm，所加壓力為30-40bar時，高壓懸漿裝填技術就變得十分復雜，為將小顆粒固定相裝入更大得制備型色譜柱，可采用柱長壓縮技術。這種方法，先將固定相懸漿(或偶爾是干填充物)裝入柱中加壓，利用物理方法將其壓緊。壓緊的方法有兩種：徑向壓縮和軸向壓縮。 濕法裝柱需要一定的設備，在柱子填完后，應用有柱效的測量，對柱效低的柱子應該重填。

　　五、產品的收集

　　手工餾分收集費時費力，自動餾分收集器有很大的方便。許多實驗室和工廠都采用了餾分收集器。

　　六、超載、邊緣切割、中心切割、放大技術與非線性效用

　　在高壓制備色譜中，因為沒有必要達到分析色譜那樣的分離度，可以在一定范圍內大大加大進樣的濃度和體積。在做分離的時候，也有一些分析色譜的時候，不能用到的技巧。

　　七、柱轉換技術

　　通過接頭或者閥門，實現柱子的簡單延長，或者比較方便地實現對其中一個(或幾個)組分的精制。